Se décrivant elles-mêmes comme « déesses des arts et proclamatrices de héros », les cinq Muses sont les narratrices du Grand Classique Hercule. Elles chantent, dans un style gospel, les récits mythologiques de la Grèce antique, à commencer par la libération du monde par Zeus, qui emprisonna les Titans à l’origine du chaos sur terre (chanson « Le Gospel Pur »).
Se présentant comme les plus grandes admiratrices d’Hercule, elles racontent en musique l’ascension fulgurante du jeune homme et sa mutation en véritable héros de la Grèce, grâce à ses victoires sur de multiples monstres et créatures (chanson « De Zéro en Héros »).
Dans la chanson « Jamais je n’avouerai », les Muses interviennent aux côtés de Mégara, qui nie avoir un faible pour Hercule, avant de finalement l’avouer.
Enfin, elles célèbrent le héros lors de la chanson « Une étoile est née » à la fin du film.
Les cinq muses sont :
Calliope, la muse de la poésie épique. Plus grande des cinq, c’est clairement la meneuse du groupe.
Clio, la muse de l’histoire. Ayant une queue de cheval, elle porte toujours un parchemin avec elle.
Thalie, la muse de la comédie. Bien en formes, c’est aussi la plus petite des cinq, et sans doute la plus comique.
Melpomène, la muse de la tragédie. Elle possède de longs cheveux bouclés et on peut la voir tenir un masque de théâtre.
Terpsichore, la muse de la danse. Deuxième muse la plus petite, elle a de courts cheveux frisés